周靖萱 , 金羽琨 , 冀采风 , 郭轩麟 , 张靓 , 邵瑞超 , 王淇 , 王丕武

吉林农业大学农学院, 长春, 130118
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 12 篇   
收稿日期: 2019年12月12日    接受日期: 2019年12月26日    发表日期: 2021年03月22日

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类钙调蛋白(CaM-likeprotein, CML)在植物抵抗逆境中发挥了重要的作用，因此研究 CML 基因是植物抗逆分子育种的一个重要分子基础。本实验室在前期工作中筛选得到 1 个片段大小为 264 bp 的大豆CML 基因，对该基因序列设计特异性引物，利用 PCR 技术对该基因进行扩增，并获得大小为 264 bp 的片段，利用无缝克隆技术连接到 pMD18T 载体上，获得克隆载体。通过对该基因的核苷酸序列分析，在 NCBI上发现该基因序列与大豆 Calcium-binding protein (CML38-like)基因序列相似度为 98.53%。目前对CML38-like基因的功能还未见报道，本研究根据克隆测序得到的基因序列构建系统进化树并分析，随后对该基因的蛋白质二级结构和蛋白质三级结构进行预测，发现该基因可能对大豆抗旱有着一定的影响。最后通过克隆载体构建 CML38-like 基因的过表达载体以及 RNA 干扰表达载体。本研究为鉴定大豆 CML38-like 基因的功能和了解该基因对大豆的非生物胁迫反应的影响提供了理论依据。
 

大豆； CML38-like 基因； 克隆； 表达载体